使用高壓釜是實驗室常用的物理消毒滅菌方式，利用一定時間的蒸汽和高壓條件來實現滅菌。與干燥空氣相比，蒸汽的導熱效率更高，121 ℃高溫下，15分鐘內即可對容器進行消毒。

大多數實驗室玻璃瓶都適用高溫高壓消毒滅菌法。但也需要注意不同玻璃瓶類型的差異，及高壓蒸養周期內的最佳實踐方法。

本文，我們解答了部分常見的問題，希望能幫助您安全地對實驗室玻璃瓶進行高溫高壓消毒滅菌。

1.所有類型的實驗室玻璃瓶都能安全地高溫高壓消毒滅菌嗎？

在進行高溫高壓消毒滅菌之前，要考慮不同玻璃和容器的適用性。高硼硅玻璃瓶具備優異的抗熱震性，可以安全地高溫高壓消毒滅菌。而由鈉鈣玻璃或含鉛玻璃制成的瓶子在高溫下則有破裂風險。

帶有塑料涂層的實驗室瓶也可以安全地進行高壓滅菌，然而，涂層材料會被蒸汽水解，能高溫高壓消毒滅菌的次數有限。

因為高溫高壓下，液體會膨脹且可能產生泡沫，玻璃器皿需留出一定空間，防止溢出。一般裝到額定容量的75%即可。不過，安全容量也取決于液體的性質，如果是水或含水緩釋液可以裝到額定容量。而瓊脂基培養基只能裝到額定容量的50%。

2.實驗室的瓶子應該如何裝入高壓釜？

首先，在操作高壓釜時，尤其是對玻璃器皿消毒滅菌時，建議穿戴個人防護裝備，包括全面的眼部/面部保護、閉趾鞋和耐熱手套。

避免將高壓釜裝得過滿，確保蒸汽能流動，實現有效消毒滅菌。除此之外，建議在將瓶子放入高壓釜之前先清洗干凈，防止污染物被烘烤到玻璃瓶壁上。

對于較大、較重的瓶子，如20升容量的瓶子，應該在里面放少量蒸餾水，以幫助在高壓釜中產生蒸汽。

3.帶螺旋蓋的玻璃瓶應該如何進行蒸汽消毒滅菌？

對瓶子進行高溫高壓消毒滅菌時，螺旋蓋必須松動，最多轉動一圈。在封閉容器中，熱脹冷縮會導致較大的氣壓差（超過4倍標準大氣壓），甚至導致爆炸故障。此外，在冷卻階段，沒有完全擰松的蓋子可能會在瓶子中產生真空。如果瓶子內的空氣沒有充分流通，里面的液體在再冷卻階段無法沸騰，因此會在很長一段時間內保持過熱狀態。切勿密封或移動裝有過熱液體的容器。如果蓋子松動（轉動1/2圈），則高壓釜內的蒸汽和瓶子內部沒有壓力差。

如果蒸汽高壓釜具備壓力補償器，則可以對帶密封蓋的瓶子安全地高壓滅菌。

在傳統的高壓釜（無壓力補償）中，透氣膜蓋是一種更安全、更方便的選擇。通過0.2微米PTFE膜進行二次壓力均衡，保持密封的同時，可降低高溫高壓消毒滅菌完成后的污染風險。透氣膜蓋不應與容量大于3500毫升的瓶子一起使用。

對于GMP規范下的制藥、醫療應用，或處理5升容量以上的瓶子時，使用配有無菌排氣過濾器的單孔瓶蓋比透氣膜蓋更合適。例如，單孔GL 45口徑的不銹鋼瓶蓋可與經認證的制藥級無菌空氣0.2微米的盤式過濾器或囊式過濾器一起使用。該方式更適合2升容量以上的較大瓶子。

4. 在高壓滅菌之前，我應該用鋁箔蓋住瓶口嗎？

這是許多研究實驗室的常見做法，但這會影響高溫高壓消毒滅菌的效果。鋁箔不應密封住瓶口，需留出蒸汽流動的空隙。消毒完成后，鋁箔并不能保護器皿免受污染。

5.高溫高壓消毒滅菌循環應持續多久？

根據應用情況，建議在+121、126或+134°C下進行蒸汽滅菌。作為參考，英國標準BS EN 285:1997 8.3.1規定：“消毒滅菌溫度分別為121°C、126°C和134°C時，持續時間應不少于15分鐘、10分鐘和3分鐘。”

可以使用生物或化學指示劑來確認高壓釜是否正常運轉。如果任一指示信號出現問題，則必須對高壓釜進行檢查。即使問題解決后，也需重新對裝載物進行高壓滅菌以確保無菌性。

也可以使用高壓滅菌膠帶。一旦達到臨界溫度，膠帶上的標記就會變得可見。然而，與其他方法不同，高壓滅菌膠帶不能確認滅菌與否，只可以識別物品是否已被高溫處理。

最后，在打開高壓釜時，確保本人站到一旁，臉和身體遠離門和蒸汽。如果可能的話，建議打開門等待十分鐘，讓物品冷卻。在移動物品之前，務必讓經過高溫高壓消毒滅菌的材料冷卻到室溫。

6.實驗室瓶子多久可以進行一次高溫高壓消毒滅菌？

這取決于瓶子的類型，鈉鈣玻璃瓶和塑料涂層瓶可承受的高溫高壓消毒滅菌頻次，少于不加涂層的高硼硅3.3玻璃瓶。

盡管高硼硅3.3玻璃具有優異的抗熱震性，但隨著時間的推移，瓶身也可能會被損壞，不再適合高溫高壓消毒滅菌。這是因為高硼硅玻璃的抗拉強度取決于其表面狀況，如果玻璃被劃傷，即便輕微到用顯微鏡才能看清，其強度也會大大降低。因此，只有表面無劃痕的瓶子可以安全地反復進行高壓滅菌循環。

然而，我們無法預測長時間使用的器皿何時會損壞。因此，DWK生命科學建議定期更換實驗器皿，并在使用前對每件物品進行徹底的目視檢查。如果發現任何劃痕、碎屑或其他破損的跡象，應立即停止使用并丟棄。